Page 5 - 《西北农业学报》2022年第7期
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西 北 农 业 学 报 2022 , 31 ( 7 ): 805-814
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网络出版日期: 2022-07-12 doi : 10.7606 / j .ssn.1004-1389.2022.07.001
网络出版地址: htt p s :// kns.cnki.net / kcms / detail / 61.1220.S.20220710.0949.002.html
马腺疫链球菌新疆株 2 种新 SeM 基因型的鉴定
及其遗传变异分析
张 欢, 张泽华, 吕芬芬, 汪 丽, 蒲小峰,张宝江, 苏 艳
( 新疆农业大学 动物医学学院, 乌鲁木齐 830052 )
摘 要 为了解马腺疫链球菌新疆流行株的基因型、 菌株的遗传多样性和系统发育特征, 采集新疆地区某马
场患病马匹下颌组织病样, 分离马腺疫链球菌( Z422 、 JMC111 ), 并对分离菌株进行生化特性和耐药特性检测,
然后进行 16SrRNA 基因序列比较和 SeM 基因分子分型。结果显示, 2 株分离菌均为马链球菌马亚种, 对头
孢噻呋、 头孢西丁、 左氧氟沙星、 诺氟沙星、 恩诺沙星、 环丙沙星、 磺胺异恶唑敏感, 对青霉素、 头孢呋辛、 氨苄西
林、 克拉霉素耐药。基于 16SrRNA 基因序列的分析显示 2 株菌均归属于 Ⅰ 群, 基因分型鉴定为新的 SeM
基因型: seM208 和 seM209 。
关键词 马腺疫链球菌新疆株; 分离鉴定; 16SrRNA 序列分析; SeM 基因型;药敏试验
中图分类号 S852.6 文献标志码 A 文章编号 1004-1389 ( 2022 ) 07-0805-10
马腺疫是一种马属动物的常发传染病 [ 1 ] , 以 rRNA 基因序列分析已成为细菌分类系统中最有
发热、 上呼吸道黏膜炎症、 下颌淋巴结肿胀化脓为 用和最常用的研究工具 [ 14 ] , 也可用于细菌性疫病
特征 [ 2-3 ] 。该病 在 世 界 范 围 流 行, 马 腺 疫 链 球 菌 的分子流行病学研究 [ 15 ] 。新疆马腺疫频繁发生,
( Stre p tococcuse q uisubs p .e q ui , S.e q ui ) 是引起 已造成严重的经济损失 [ 16 ] 。本研究对从新疆伊
该病的病原菌, 是 C 群链球菌的成员 [ 4 ] 。该病目 犁地区分离鉴定的 2 株 S.e q ui ( Z422 、 JMC111 )
前仍困扰世界养马业 [ 5-6 ] 。 进行生 化 及 药 敏 特 性 检 测, 并 对 菌 株 进 行 16S
seM 蛋白是位于 S.e q ui 菌体表面一种耐热 rRNA 基因序列分析和 SeM 基因分型, 从全球基
耐酸的纤维蛋白, 是该菌重要的毒力因子和保护 因数据库层面了解和掌握 S.e q ui 新疆地方株基
性抗原 [ 7 ] , 能够与纤维蛋白原及免疫球蛋白 I g G 因型的特点, 以期为新疆地区马腺疫的有效防控
结合, 抑制吞噬细胞的吞噬功能并参与机体的免 提供科学依据。
疫调理功能 [ 8-9 ] 。由于环境、 宿主免疫压力的影响
1 材料与方法
使seM 蛋白的 N 端不断变异并表现出序列多样
1.1 材 料
性, 不同地区马腺疫链球菌分离株的 seM 蛋白 N
端序列往往会有明显的差异 [ 10-11 ] 。目前, SeM 基 无菌采集新疆伊犁某马场发病马匹的下颌肿
因的多样性已成为对该病进行菌株来源分析及疾 胀组织及分泌液, 从 2 个马场分别采集病样 12 份
病流行病学分析的重要指标 [ 12-13 ] 。 SeM 基 因 分 及 15 份。 PCR 扩增引物由生工生物工程( 上海)
型是依据该基因在不同菌株之间的多态性而建立 股份有限公司合成( 表 1 )。营养肉汤培养基、 TH
的基因分型方法, 不仅可以在全球数据库中对分 培养基、 琼脂粉、 细菌微量生化反应管、 药敏试纸,
离菌株进行比对分析, 还可跟踪分离菌株流行演 均购自杭州滨和微生物试剂有限公司; 基因组提
化特征, 有利于对该病的有效防控。 取试剂盒、 胶回收试剂盒、 质粒提取试剂盒均购自
16SrRNA 基 因 具 有 良 好 的 保 守 性, 16S 天根 生 化 科 技 ( 北 京) 有 限 公 司; DL2000 DNA
收稿日期: 2021-04-08 修回日期: 2021-05-11
基金项目:国家自然科学基金( U1803108 )。
第一作者:张 欢, 女, 硕士研究生, 研究方向为微生物分子致病与免疫。 E-mail : 958707783@ qq .com
张泽华, 男, 硕士研究生, 研究方向为微生物分子致病与免疫。 E-mail : 839803542@ qq .com
通信作者:苏 艳, 女, 博士, 教授, 研究方向为病原菌分子致病与免疫机制。 E-mail : 2006au@163.com